FDA日前批準(zhǔn)了阿斯利康的Imjudo (tremelimumab) 聯(lián)合 Imfinzi (durvalumab)的雙免疫調(diào)節(jié)劑治療肝細(xì)胞癌的療法，這也是FDA今年第二次批準(zhǔn)雙免疫療法對(duì)于腫瘤的治療。今年3月18日，百時(shí)美施貴寶的Opdualag^TM （nivolumab 和 relatlimab-rmbw)獲得FDA批準(zhǔn)，用于治療不可切除或轉(zhuǎn)移性黑色素瘤 (unresectable or metastatic melanoma)。

       抗體無(wú)疑是包括雙免疫療法在內(nèi)的免疫療法治療腫瘤的主力軍，然而，抗體具有成本高、口服適用性差等缺點(diǎn)。比抗體分子量小很多的多肽藥物，在免疫療法對(duì)抗腫瘤的治療中也發(fā)揮著不可忽視的作用。

       多肽因其體積小、親和力高、易修飾、免疫原性低等優(yōu)點(diǎn)，在腫瘤診療領(lǐng)域也備受關(guān)注。一些修飾肽表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。,例如FDA今年批準(zhǔn)的兩款雙免疫調(diào)節(jié)劑中的抗體蛋白。多肽分子可以在腫瘤免疫療法中充當(dāng)免疫檢查點(diǎn)阻滯劑（immune checkpoint inhibitor）。免疫治療藥物不直接攻擊腫瘤細(xì)胞，而是調(diào)節(jié)患者自身的免疫系統(tǒng)，并通過(guò)靶向免疫檢查點(diǎn)攻擊腫瘤細(xì)胞。

       免疫檢查點(diǎn)和免疫檢查點(diǎn)抑制劑

       1 免疫檢查點(diǎn)

       當(dāng)免疫細(xì)胞T 細(xì)胞表面上的蛋白質(zhì)識(shí)別并與其他細(xì)胞（例如某些腫瘤細(xì)胞）上的伴侶蛋白結(jié)合時(shí)，免疫檢查點(diǎn)就會(huì)起作用。這些T細(xì)胞上的蛋白質(zhì)被稱為免疫檢查點(diǎn)。當(dāng)檢查點(diǎn)和癌細(xì)胞的伴侶蛋白結(jié)合在一起時(shí)，它們會(huì)向 T 細(xì)胞發(fā)送“關(guān)閉”信號(hào)。免疫檢查點(diǎn)分子在腫瘤的免疫逃逸中扮演關(guān)鍵角色，臨床上可以通過(guò)阻斷免疫檢查點(diǎn)與配體的結(jié)合來(lái)恢復(fù)免疫細(xì)胞的抗腫瘤功能，達(dá)到治療腫瘤的目的。

       2 免疫檢查點(diǎn)抑制劑

       由于免疫檢查點(diǎn)有助于防止免疫反應(yīng)過(guò)強(qiáng)，有時(shí)可以防止 T 細(xì)胞殺死癌細(xì)胞，所以當(dāng)這些檢查點(diǎn)被阻斷（抑制）時(shí)，T細(xì)胞可以更好地殺死癌細(xì)胞，這對(duì)于腫瘤治療無(wú)疑會(huì)產(chǎn)生非常積極的作用。免疫檢查點(diǎn)是癌癥免疫治療的靶點(diǎn)，因?yàn)樗鼈冇锌赡苡糜诙喾N類型癌癥的治療。目前批準(zhǔn)的檢查點(diǎn)抑制劑可以阻斷 CTLA4 和 PD-1 和 PD-L1。

       多肽免疫檢查點(diǎn)抑制劑

       1 CTLA4抑制劑

       CTLA-4 或 CTLA4（細(xì)胞毒 性 T 淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白 4），也稱為 CD152，是一種蛋白質(zhì)受體，可作為免疫檢查點(diǎn)并下調(diào)免疫反應(yīng)。CTLA-4 在調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞中被表達(dá)，但僅在被激活后在常規(guī) T 細(xì)胞中上調(diào)，這種現(xiàn)象在癌癥中尤為明顯。

       針對(duì)免疫檢查點(diǎn)CLTA4的mAb抗體抑制劑有治療黑色素瘤的Ipilimumab。很多活性多肽也對(duì)CTLA4表現(xiàn)出良好的抑制效果，例如酵母展示肽ERY2-4 (圖1) 與 CTLA-4特異性結(jié)合，KD 為 196.8 ± 2.3 nM。此外，ERY2-4阻斷 CTLA-4 與在其表面呈現(xiàn) B7 的樹(shù)突細(xì)胞 (DC) 之間的相互作用。重要的是，ERY2-4 對(duì) CD28 沒(méi)有顯示交叉反應(yīng)性，表明它不會(huì)抑制 T 細(xì)胞活化。由于 CTLA-4 是限制癌癥免疫反應(yīng)的關(guān)鍵免疫檢查點(diǎn)，因此這種抑制性多肽代表了一類新的免疫治療候選藥物。

       圖1. 酵母展示肽ERY2-4化學(xué)結(jié)構(gòu)。

       2 PD-1

       雖然PD-1和 CTLA-4 屬于 CD-28 免疫檢查點(diǎn)受體家族，但它們?cè)谝种泼庖叻磻?yīng)中的作用在機(jī)制上是不同的。 CTLA-4 在早期主要在淋巴結(jié)中調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，而 PD-1 在后期主要在外周組織中調(diào)節(jié)免疫抑制。盡管針對(duì)這兩種途徑的臨床批準(zhǔn)的抗體產(chǎn)生了持久的臨床反應(yīng)，但它們都會(huì)導(dǎo)致不良事件，其中，抗 CTLA-4 抗體的發(fā)生率和免疫相關(guān)不良反應(yīng)級(jí)別更高。PD-1/PD-L1 檢查點(diǎn)抑制劑在療效和安全性方面更好的臨床特征已促使快速的藥物開(kāi)發(fā)，并在多個(gè)適應(yīng)癥中獲得批準(zhǔn)。在這一領(lǐng)域，Bristol-Myers Squibb 為他們的環(huán)肽申請(qǐng)了專利，顯示在抑制PD-1/PD-L1 相互作用方面具有納摩爾活性。

       圖2. WO2017176608專利多肽，PD-1/PD-L1與CD80/PD-L1蛋白結(jié)合抑制劑。

       3 BTLA-4

       B 和 T 淋巴細(xì)胞衰減因子 (BTLA) 是 CD-28 家族中的又一個(gè)共抑制受體。在最近的一份報(bào)告中，基于與BTLA結(jié)合的天然蛋白HVEM (herpesvirus entry mediator，皰疹病毒進(jìn)入介導(dǎo)蛋白)，研究人員使用 HVEM (14-39) 片段（圖 3）設(shè)計(jì)了一種雙二硫鍵橋接肽，并使用表達(dá) BTLA 的 293T 細(xì)胞證明了其細(xì)胞活性。HVEM (14–39) 肽是 BTLA/HVEM 結(jié)合的抑制劑，以劑量依賴性方式抑制 BTLA/HVEM 復(fù)合物的形成。在免疫療法對(duì)抗腫瘤的領(lǐng)域具有開(kāi)發(fā)價(jià)值。

       圖3. HVEM (14-39) 肽分子結(jié)構(gòu)。

       4 VISTA

       VISTA 是 B7 家族中的一個(gè)免疫檢查點(diǎn)，與 PD-1 蛋白協(xié)同調(diào)節(jié) T 細(xì)胞反應(yīng)。 CTLA-4 和 PD-1 在 T 細(xì)胞啟動(dòng)和效應(yīng)階段抑制免疫功能，而 VISTA 在 T 細(xì)胞活化的最早階段抑制免疫反應(yīng)。為此研究人員設(shè)計(jì)了VISTA多肽拮抗劑。這是一個(gè)包含一個(gè)二硫鍵和多個(gè)D-氨基酸殘基的環(huán)肽（圖4）。

       圖4. VISTA多肽抑制劑。

       與抗 VISTA 抗體或抗 PD-L1 抗體相比，該多肽VISTA拮抗劑顯著增強(qiáng) T 細(xì)胞的增殖。此外，這種 VISTA拮抗劑多肽的抗腫瘤功效在免疫原性膀胱癌 MB49 的模型中得到證實(shí)。作者指出，作用機(jī)制可能是多肽與 VISTA 的關(guān)鍵/活性位點(diǎn)結(jié)合，從而阻斷 VISTA 的免疫抑制功能。

       5 LAG-3

       LAG-3 是繼 CTLA-4 和 PD-1 之后第三個(gè)臨床靶向的免疫檢查點(diǎn)受體。LAG-3 與其它受體，尤其是與 PD-1 共表達(dá)，在多種環(huán)境中抑制免疫功能，使其成為與 PD-1 組合的有吸引力的靶標(biāo)?？?LAG-3 和抗 PD-1 抗體的聯(lián)合治療在黑色素瘤上取得了成功。百時(shí)美施貴寶的 Opdualag^TM于2022年3月18日獲得FDA批準(zhǔn)，其活性成分nivolumab 和 relatlimab-rmbw分別是PD-1和LAG-3的拮抗劑。Opdualag^TM 也因此成為了FDA批轉(zhuǎn)的第一款靶標(biāo)LAG-3的免疫療法。

       在多肽類的LAG-3拮抗劑的研究中，研究人員設(shè)計(jì)了命名為C25的二硫鍵環(huán)肽（圖5），C25的KD值在mM量級(jí)，可以有效地與LAG-3結(jié)合，從而有效地干擾LAG-3和MHC-II（主要組織相容性復(fù)合體蛋白II）之間的結(jié)合。

       圖5. LAG-3拮抗劑C25化學(xué)結(jié)構(gòu)

       總結(jié)

       免疫檢查點(diǎn)拮抗劑目前以抗體為主，但低反應(yīng)率和免疫相關(guān)不良事件需要開(kāi)發(fā)更有效和更安全的治療方式。多肽藥物在選擇性、功效和降低脫靶毒 性方面具有潛在優(yōu)勢(shì)。多肽免疫療法在未來(lái)可能開(kāi)創(chuàng)與抗體藥物齊頭并進(jìn)的局面，或許也能出現(xiàn)類似于Opdualag^TM 那樣的屬于多肽的雙免疫療法。

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