在免疫學研究中,免疫健全的小鼠模型是探索免疫系統(tǒng)功能和疾病機制的關(guān)鍵工具。然而,小鼠原代免疫細胞的基因編輯一直是技術(shù)難點。為突破這一瓶頸,西湖大學聯(lián)合西湖凝聚體團隊成功開發(fā)了一種全新的基因遞送系統(tǒng)——ProteanFect CRISPRMax小鼠免疫細胞轉(zhuǎn)染試劑盒,基于創(chuàng)新的內(nèi)源蛋白凝聚體技術(shù),顯著提高了基因編輯效率和細胞存活率,為免疫學和基因編輯研究提供了強有力的技術(shù)支持。
不同基因遞送方法方法在小鼠原代免疫細胞中的功能比較
用戶親證:ProteanFect CRISPRMax在小鼠原代T細胞實現(xiàn)97%高效基因編輯
陸軍軍醫(yī)大學的研究團隊使用 ProteanFect CRISPRMax 在小鼠原代 T 細胞中共轉(zhuǎn)染 Cas9 mRNA、sgRNA 和 EGFP-mRNA,成功實現(xiàn):
● 高轉(zhuǎn)染效率– 在 EGFP 陽性 T 細胞中,97% 的細胞未檢測到目標基因表達,提示基因敲除效果顯著。
● 高效共轉(zhuǎn)– 通過 EGFP、Puro 等篩選標簽,精準富集成功基因編輯的細胞。
● 低細胞毒性– 細胞生存率高,且生理功能未受影響。
圖1: ProteanFect CRISPRMax實現(xiàn)在小鼠原代T細胞的高效基因編輯
ProteanFect 何以如此高效?
ProteanFect 創(chuàng)新基因遞送方式
ProteanFect CRISPRMax采用了一種創(chuàng)新的生物分子凝聚體技術(shù):ProteanFect 通過將蛋白分子和核酸自組裝成一種規(guī)則的納米顆粒,這些納米顆粒能夠通過細胞的主動內(nèi)吞機制進入細胞內(nèi)部。這些顆粒穩(wěn)定而功能強大,可以保護 mRNA 免受降解并保持其活性。此外,這種設(shè)計無需額外的化學修飾,從而減少了細胞毒性,顯著提升實驗的安全性。
圖2:ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒
ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯原理
1、通過共轉(zhuǎn)染 Cas9 mRNA 與 sgRNA,成功表達 Cas9 蛋白。
2、Cas9 蛋白與 sgRNA 在細胞內(nèi)自組裝形成 RNP 復合物。
3、RNP 復合物進入細胞核并實現(xiàn)高效基因編輯。
圖3:ProteanFect核酸遞送原理示意圖
圖4:使用ProteanFect CRISPRMax Cas9試劑盒在人原代T細胞和小鼠原代T細胞中實現(xiàn)高效基因標記,基因編輯效率范圍為67%-88%。
即用型CRISPR基因編輯試劑盒,讓實驗更高效!
ProteanFect CRISPRMax 一體化設(shè)計,助力高效基因編輯
● Cas9 mRNA & sgRNA 同步遞送,實現(xiàn)精準編輯
● 優(yōu)化編輯窗口期,提高基因敲除效率
● 適用于人源 & 小鼠原代 T 細胞,靈活應對難轉(zhuǎn)染細胞
● 標準化試劑盒,輕松上手,無縫銜接您的實驗流程!
圖5:ProteanFect CRISPRMax轉(zhuǎn)染試劑盒成分表
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