基于對(duì)行業(yè)需求的深刻洞察和多年技術(shù)積累，上?；煌瞥隽嗣庖呦到y(tǒng)與肝臟雙重人源化小鼠模型，將免疫系統(tǒng)和肝臟兩大維度的人源化技術(shù)融會(huì)貫通，為前臨床研究提供了前所未有的高保真平臺(tái)。

       雙重人源化小鼠模型選用 BRGSF (BALB/c-Rag2tm1FwaIl2rgtm1CgnSirpαNODFlk2tm1lrl) 小鼠作為基礎(chǔ)。這是一款高度免疫缺陷小鼠模型，適用于人源化免疫系統(tǒng)的重建。該小鼠缺失 Rag2 和 IL2rg 基因，導(dǎo)致 T、B 細(xì)胞及 NK 細(xì)胞完全缺失，同時(shí)攜帶 SirpαNOD 突變，提高了外源人源細(xì)胞的植入效率。此外，F(xiàn)lk2 基因敲除進(jìn)一步抑制小鼠自身的髓系細(xì)胞發(fā)育，為后續(xù)人源化免疫系統(tǒng)提供了更純粹的免疫缺陷微環(huán)境。

       該模型可以將高純度人臍帶血來(lái)源的 CD34? 細(xì)胞，注入到經(jīng)放射清髓處理后的 BRGSF 小鼠新生仔鼠，12-16周后，外周血中的 hCD45? 人源化程度可穩(wěn)定達(dá)到 45% 以上，人源 T、B、NK 及髓系細(xì)胞譜系得到完整再建立。BRGSF 在人髓系細(xì)胞定植、免疫功能成熟和 GvHD 延遲發(fā)生方面，均表現(xiàn)出更自然、更穩(wěn)定的優(yōu)勢(shì)。以此模型為基礎(chǔ)，旨在實(shí)現(xiàn)對(duì)人類免疫系統(tǒng)更完整的重建。

       圖1. 在BRGSF小鼠上進(jìn)行免疫系統(tǒng)人源化重建流程

       在免疫缺陷鼠的基礎(chǔ)上，從理論與實(shí)際實(shí)行中對(duì)比下述的各種方法：

•        在 BRGSF 小鼠運(yùn)用基因編輯技術(shù)將 FAH（富馬酰乙酰乙酸水解酶）基因敲除，通過(guò)NTBC（2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲?；?-1,3-環(huán)己二酮）來(lái)誘導(dǎo)肝損傷；
•        DPP-IV 抑制劑聯(lián)合碳四氯化物（CCl4）或阿霉素（Doxorubicin）誘導(dǎo)肝損傷；
•        利用慢病毒或 AAV 載體表達(dá) shRNA 或 CRISPR-Cas9 系統(tǒng)，特異性敲低小鼠肝細(xì)胞增殖相關(guān)基因（如Mdm2）；
•        運(yùn)用自主研發(fā)或者合作伙伴的藥物化合物來(lái)誘導(dǎo)肝損傷，并持續(xù)性的誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，減少對(duì)后續(xù)人源肝細(xì)胞的移植所產(chǎn)生的影響。

       最終采用最佳策略誘導(dǎo)肝損傷，用以控制肝細(xì)胞耗竭劑的基因表達(dá)，開(kāi)發(fā)一種特異性針對(duì)小鼠肝細(xì)胞的耗竭技術(shù)，對(duì)其他小鼠細(xì)胞類型（及人類肝細(xì)胞）無(wú)影響。且耗竭程序必須能夠以漸進(jìn)方式實(shí)現(xiàn)小鼠肝細(xì)胞的完全降解，以支持強(qiáng)效移植物存活。最終實(shí)現(xiàn)對(duì)小鼠自身肝細(xì)胞的周期性、定時(shí)耗竭，與人源肝細(xì)胞的高效定植相結(jié)合。

       圖2. 雙重人源化小鼠的構(gòu)建流程示意圖

       基于免疫系統(tǒng)與肝臟雙重人源化，可以評(píng)估抗腫瘤抗體偶聯(lián)物（ADC）的 ADCC/ADCP 效應(yīng)，還能同步監(jiān)測(cè)肝臟藥代動(dòng)力學(xué)（PK）、代謝產(chǎn)物（CYP450、UGT、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）以及免疫相關(guān)毒性，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物全方位、一體化的前臨床評(píng)價(jià)。同時(shí)也可以通過(guò)病毒或者化學(xué)藥物誘導(dǎo)病毒性，自身免疫學(xué)肝炎模型，用以探究免疫系統(tǒng)及免疫細(xì)胞在肝炎中的作用機(jī)制。最終可以通過(guò)追蹤初級(jí)膽汁酸與次級(jí)膽汁酸的產(chǎn)出評(píng)估肝腸之間的代謝免疫的交流與調(diào)控。

       展望未來(lái)，上海基锘威聯(lián)手 genOway 法國(guó)將繼續(xù)完善和迭代雙重人源化平臺(tái)，重點(diǎn)部署：

•        基因和細(xì)胞因子優(yōu)化：引入 hFLT3L、hGM-CSF、hIL-15、hBAFF 等支持多譜系髓系與淋巴系細(xì)胞功能；
•        多模態(tài)組學(xué)驗(yàn)證：聯(lián)合單細(xì)胞 RNA-seq、空間組學(xué)、代謝組學(xué)與質(zhì)譜成像，真實(shí)解析免疫-肝臟互作機(jī)制；
•        國(guó)際合作與標(biāo)準(zhǔn)化：攜手 FDA/EMA 認(rèn)可的 CRO 和學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)共同制定人源化模型評(píng)價(jià)指南，推動(dòng)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化；
•        臨床前解決方案拓展：圍繞腫瘤、代謝、感染、免疫等多疾病領(lǐng)域，提供定制化"模型+數(shù)據(jù)+咨詢"一體化服務(wù)，助力全球藥企和研發(fā)團(tuán)隊(duì)加速創(chuàng)新轉(zhuǎn)化。

       肝臟疾病領(lǐng)域的未來(lái)，注定是人源化與智能化并行的時(shí)代。免疫系統(tǒng)與肝臟雙重人源化小鼠模型正是連接研發(fā)與臨床的那座堅(jiān)實(shí)橋梁，讓每一款新藥在走進(jìn)臨床前，都擁有最貼近人體的預(yù)測(cè)能力。我們相信，在不遠(yuǎn)的將來(lái)，基于這一平臺(tái)的前臨床數(shù)據(jù)，將成為制藥攻關(guān)的"金標(biāo)準(zhǔn)"，為全球肝臟疾病治療和精準(zhǔn)醫(yī)療帶來(lái)真正革新。

       請(qǐng)關(guān)注 2025 年 6 月 27-28 日在蘇州舉辦的美國(guó)華人生物醫(yī)藥科技協(xié)會(huì) CBA-China 中國(guó)年會(huì)，上海基锘威將攜雙重人源化模型的更多細(xì)節(jié)，以及其他人源化小鼠模型，在 DT10 展臺(tái)恭候您的光臨。

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