3月1日，由諾獎得主Jennifer Doudna教授聯(lián)合創(chuàng)建的Intellia Therapeutics公司（以下簡稱Intellia）和再生元（Regeneron Pharmaceutical）公布了其體內(nèi)基因組編輯候選療法NTLA-2001的最新I期臨床試驗數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)顯示，NTLA-2001可以快速、深度、持久地減少患者血清中致病蛋白的水平。3月2日，Intellia再宣布，該公司開發(fā)的NTLA-5001，已經(jīng)在治療急性髓系白血病（AML）患者的I/IIa期臨床試驗中完成首例患者給藥。標志著該公司基因編輯技術(shù)迎來新的里程碑。

       Intellia成立于2014年，作為目前CRISPR/Cas9領(lǐng)域領(lǐng) 先的基因編輯公司，Intellia意在針對在Ex Vivo（體外）與In Vivo（體內(nèi)）基因治療開發(fā)出專有的革命性產(chǎn)品，使用成熟的細胞傳輸技術(shù)來充分發(fā)揮、拓展CRISPR/Cas9的能力，從而成功插入和修復(fù)基因中的DNA，以達到治療的目的與效果。Intellia通過不斷優(yōu)化CRISPR/Cas9技術(shù)，致力于為患者快速開發(fā)出具有針對性的治療藥物。

       基因“魔剪”——CRISPR/Cas9

       CRISPR/Cas系統(tǒng)是原核生物的一種天然免疫系統(tǒng)。某些細菌在遭到病毒入侵后，能夠把病毒基因的一小段存儲到自身的DNA里一個稱為CRISPR的存儲空間。當再次遇到病毒入侵時，細菌能夠根據(jù)存寫的片段識別病毒，將病毒的DNA切斷而使之失效。CRISPR 系統(tǒng)有 Ⅰ 型、Ⅱ 型和 Ⅲ 型，其中 CRISPR / Cas9 作為 Ⅱ 型研究最多，其介導(dǎo)的基因編輯可用于生成轉(zhuǎn)基因模型、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄、調(diào)控表觀遺傳等。

       由于CRISPR 具有簡單、廉價和高效等優(yōu)勢，因此它已經(jīng)成為全球最為流行的基因編輯技術(shù)，被稱為編輯基因的“魔剪”?？茖W(xué)家通過它可以高效、精確地改變、編輯或替換植物、動物甚至是人類身上的基因，經(jīng)過改造的 CRISPR 技術(shù)可被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)藥和其他領(lǐng)域。

       Intellia的長期戰(zhàn)略是利用其CRISPR-Cas9技術(shù)平臺成立一個全方位的基因編輯產(chǎn)品管線，同時布局體內(nèi)和體外療法，以解決目前治療效果尚不理想的疾病。體內(nèi)項目：使用靜脈注射CRISPR作為治療手段，在這種療法中，專有的遞送技術(shù)能夠允許直接在特定的靶組織內(nèi)對致病基因進行高度精確的編輯。體外項目：使用CRISPR來創(chuàng)造療法，即通過使用工程化人類細胞來治療癌癥和自身免疫性疾病。

       體內(nèi)療法研發(fā)管線

       Intellia體內(nèi)管線（來源：Intellia官網(wǎng)）

       NTLA-2001

       NTLA-2001是Intellia公司用于治療轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性（ATTR）的在研療法。ATTR是一種致命且易惡化的疾病，其成因是不溶性淀粉樣蛋白異常形成、沉積到多個器官和組織，導(dǎo)致人體系統(tǒng)性衰竭。當 TTR 淀粉樣蛋白沉積在心臟、神經(jīng)和其他組織中時，患者便會發(fā)病，導(dǎo)致感覺、運動和自主神經(jīng)功能障礙。典型時間段在成年期，可在2至15年內(nèi)致死。

       ATTR 有兩種發(fā)病形式，一種源于遺傳（名為 hATTR，遺傳型），另一種則是在沒有任何 TTR 基因突變的情況下，ATTR 自發(fā)形成（名為 wtATTR，野生型）。據(jù)估計，全世界大約有5萬人患有 hATTR，20萬至50萬人患有 wtATTR。目前已獲批的ATTR療法雖然能夠減緩或阻止神經(jīng)病變的癥狀，但要求患者一生長期治療。此外，許多患者病情并未緩解，這意味著我們?nèi)孕韪行У寞煼ā?/p>

       NTLA-2001 采用體內(nèi)肝 臟基因剔除的方法來治療ATTR。通過CRISPR/Cas9 技術(shù)使肝 臟中的 TTR 基因失效，血清中 TTR 的水平便能夠大大降低，進而減緩神經(jīng)和心臟中多余的 TTR 蛋白產(chǎn)生，從而阻止惡化、甚至是治愈病患，且療效是可持續(xù)的，意味著患者們可能不再需要終身服藥。

       在3月1日公布的臨床試驗數(shù)據(jù)顯示，所有的給藥劑量都耐受良好，且在最高的兩個劑量組中，目標蛋白的血清水平分別取得平均86%和93%的降低，且在隨訪時間為2到12個月的間隔里，血清TTR蛋白的降低水平維持穩(wěn)定。

NTLA-2001的作用持久性數(shù)據(jù)（來源：Intellia公司官網(wǎng)）

       NTLA-2002

       NTLA-2002是Intellia第二款體內(nèi)基因編輯療法，用于治療成人遺傳性血管水腫（HAE）。HAE是一種罕見的遺傳性疾病，其特征為身體各器官和組織發(fā)生嚴重、反復(fù)和不可預(yù)測的炎癥發(fā)作，可導(dǎo)致疼痛、衰弱和危及生命。目前的治療選擇通常需要終生治療，并可能需要每周2次的長期靜脈或皮下給藥，或每日口服給藥。盡管長期用藥，患者仍會發(fā)生突破性發(fā)作。

       NTLA-2002旨在使用CRISPR/Cas9技術(shù)對激肽釋放酶B1基因（KLKB1）進行基因組編輯，該基因負責編碼激肽釋放酶前體蛋白。通過讓KLKB1失活，NTLA-2002可永 久性降低激肽釋放酶活性，以達到治愈疾病的目的。NTLA-2002包含靶向致病基因的指導(dǎo)RNA（gRNA），和編碼Cas9酶的mRNA，它們共同開展精準編輯。

       目前，Intellia已啟動NTLA-2002的I/II期臨床試驗，預(yù)計在今年下半年報告臨床試驗中的安全性和活性數(shù)據(jù)。

       NTLA-3001

       NTLA-3001是一款治療α-1抗胰蛋白酶缺乏癥（AATD）相關(guān)肺部疾病的體內(nèi)基因編輯療法。AATD是一種遺傳性疾病，可能導(dǎo)致肺部疾病或肝 臟疾病。肺部問題通常表現(xiàn)為呼吸短促，喘息或肺部感染風險增加。NTLA-3001通過單次給藥后靶向插入功能性SERPINA1基因，從而持續(xù)產(chǎn)生正常人類水平的功能性α-1抗胰蛋白酶，同時減少疾病相關(guān)蛋白的表達。

       目前NTLA-3001的I/II期臨床試驗正在進行中。

       體外療法研發(fā)管線

       Intellia體外管線（來源：Intellia官網(wǎng)）

       NTLA-5001

       NTLA-5001是一款基于體外CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)的自體T細胞受體（TCR）-T細胞療法，靶向腎母細胞瘤1（WT1）抗原，用于治療急性髓系白血病（AML）的所有基因亞型。這種自體細胞治療候選藥物設(shè)計用于攜帶HLA-A*02：01等位基因的患者。

       AML是成人急性白血病中最常見的類型，2020年估計新發(fā)病例超過2萬。盡管目前有AML的治療方法可用，但患者的5年總生存率仍低于30%。此外，即使在那些獲得緩解的病人中，AML復(fù)發(fā)也很常見。雖然額外治療在某些情況下可行，但復(fù)發(fā)和難治的病人治愈率極低。AML通常表現(xiàn)為WT1抗原的過度表達。

       目前NTLA-5001已經(jīng)在治療AML患者的I/IIa期臨床試驗中完成首例患者給藥。NTLA-5001也有潛力靶向WT1陽性的實體腫瘤，如卵巢癌、膠質(zhì)母細胞瘤、肺癌和間皮瘤。

NTLA-5001作用機制（圖片來源：Intellia公司官網(wǎng)）

       OTQ923/HIX763

       OTQ923/HIX763是一種基于造血干細胞（HSC）基因組編輯的研究性鐮狀貧血癥（SCD）治療，使用CRISPR/Cas9 RNA研究方案，該方案是Intellia與諾華的細胞治療研究合作確定的。這種治療方法導(dǎo)致星狀細胞DNA的高度靶向編輯，以誘導(dǎo)胎兒血紅蛋白（HbF）的表達。編輯好的細胞返回患者體內(nèi)，預(yù)計HbF的表達將減少鐮狀血紅蛋白（HbS）的有害影響。目前正處于I/II期臨床試驗研究。

       以CRISPR技術(shù)為代表的基因編輯技術(shù)，在人類疾病治療領(lǐng)域的潛力是顯而易見的，但其潛在風險卻仍不十分清楚。為了幫助這些CRISPR基因編輯研究從實驗室走向應(yīng)用，亟需一個如何評估基因組編輯產(chǎn)品的安全性和質(zhì)量以及解決潛在風險的指導(dǎo)文件。

       3月15日，F(xiàn)DA發(fā)布了一項涉及人類基因組編輯的人類基因治療產(chǎn)品的指導(dǎo)文件草案。同一天，F(xiàn)DA還發(fā)布了一項關(guān)于CAR-T、CAR-NK和TCR-T細胞療法的指導(dǎo)文件草案。

       在該草案中，F(xiàn)DA向開發(fā)涉及人類體細胞基因組編輯的人類基因治療產(chǎn)品的研究團隊提出指導(dǎo)建議。該草案給出了應(yīng)在IND申請時提供的信息的建議，其中包括產(chǎn)品設(shè)計、制造、測試、臨床前安全評估和臨床試驗設(shè)計，以便于評估這些研究性基因治療產(chǎn)品的安全性和質(zhì)量。

       對于基因編輯這一行業(yè)來說，CRISPR 革命才剛剛開始，隨著政策的規(guī)范化指導(dǎo)以及人們對疾病新的有效靶點的研究突破，基因編輯技術(shù)的臨床轉(zhuǎn)化和應(yīng)用研究值得拭目以待，這將成為下一代轉(zhuǎn)化療法和治療范例的關(guān)鍵，也將促進個體化醫(yī)療的快速發(fā)展。

       最后，期待Intellia能在不久的將來能為我們帶來更多、更優(yōu)的治療方案。

       參考來源：

       1. Intellia and Regeneron Announce Landmark Clinical Data Showing Deep Reduction in Disease-Causing Protein After Single Infusion of NTLA-2001, an Investigational CRISPR Therapy for Transthyretin (ATTR) Amyloidosis. Retrieved July 1, 2021, from https://ir.intelliatx.com/news-releases/news-release-details/intellia-and-regeneron-announce-landmark-clinical-data-showing;

       2. ?Intellia Therapeutics Receives Authorization to Initiate Phase 1/2 Clinical Trial of NTLA-2002 for the Treatment of Hereditary Angioedema. Retrieved October 6, 2021, from https://ir.intelliatx.com/news-releases/news-release-details/intellia-therapeutics-receives-authorization-initiate-phase-12；

       3. Intellia Therapeutics Announces First Patient Dosed in Phase 1/2a Clinical Trial of NTLA-5001 for the Treatment of Acute Myeloid Leukemia. Retrieved March 1, 2022, from https://ir.intelliatx.com/news-releases/news-release-details/intellia-therapeutics-announces-first-patient-dosed-phase-12a.