生物安全柜作為制藥行業(yè)的關(guān)鍵設(shè)備，其核心功能在于精準(zhǔn)的氣流控制，通過(guò)合理的氣流方向設(shè)計(jì)，有效控制實(shí)驗(yàn)中氣溶膠、粒子和微生物的傳播，從而全方位保護(hù)環(huán)境、樣本和操作人員的安全。為確保生物安全柜性能符合GMP要求，定期驗(yàn)證確認(rèn)至關(guān)重要，這不僅顯著降低了潔凈區(qū)的污染風(fēng)險(xiǎn)，更為制藥企業(yè)等對(duì)空氣凈化要求極高的場(chǎng)所筑牢了安全防線。隨著行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的不斷升級(jí)，中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)主導(dǎo)制定的《生物制品生產(chǎn)用生物安全柜》征求意見(jiàn)稿應(yīng)運(yùn)而生，為生物安全柜性能參數(shù)校準(zhǔn)及企業(yè)驗(yàn)證過(guò)程提供了明確依據(jù)和參考指南。面對(duì)這一新規(guī)范，藥品生產(chǎn)企業(yè)的驗(yàn)證管理員應(yīng)如何高效開(kāi)展生物安全柜的性能確認(rèn)，以保障藥品生產(chǎn)的安全與效率？讓我們深入探討這一重要主題。

       一、生物安全柜的定義和分類(lèi)

       生物安全柜（Biological Safety Cabinet，BSC）是一種箱型空氣凈化負(fù)壓安全裝置，可防止實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中含有危險(xiǎn)性或未知性的生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸。它廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域：在微生物實(shí)驗(yàn)室中，用于處理細(xì)菌、病毒、真菌等病原微生物，防止其擴(kuò)散，保障操作人員安全；在細(xì)胞與組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，提供潔凈環(huán)境，避免外界污染物干擾，確保培養(yǎng)成功；在生物制品生產(chǎn)領(lǐng)域，防止微生物污染生產(chǎn)樣品，保護(hù)操作人員免受有害試劑或轉(zhuǎn)基因材料危害；在制藥與生物制劑生產(chǎn)中，確保產(chǎn)品無(wú)菌性和安全性，防止生產(chǎn)污染。

       生物安全柜根據(jù)NSF49標(biāo)準(zhǔn)分為三類(lèi)。Ⅰ級(jí)生物安全柜僅保護(hù)操作人員和環(huán)境，不保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料，空氣經(jīng)正面吸入、HEPA過(guò)濾后排放。Ⅱ級(jí)生物安全柜可同時(shí)保護(hù)操作人員、樣品和環(huán)境，通過(guò)垂直氣流將HEPA過(guò)濾后的潔凈空氣送入工作區(qū)，防止外部空氣污染樣品，避免內(nèi)部污染物外泄，分為A1、A2、B1、B2四型。Ⅲ級(jí)生物安全柜是全密閉安全柜，適用于處理最危險(xiǎn)病原體或高風(fēng)險(xiǎn)材料，操作人員通過(guò)手套箱與實(shí)驗(yàn)材料接觸，操作全程在封閉環(huán)境中進(jìn)行，杜絕氣體或微生物外泄。

       二、生物安全柜性能確認(rèn)主要項(xiàng)目和可接受標(biāo)準(zhǔn)

       藥品生產(chǎn)企業(yè)等生物安全柜使用單位為確保生物安全柜性能安全，一般情況下建議每年對(duì)生物安全柜的整體性能進(jìn)行檢測(cè)。生物安全柜性能確認(rèn)主要項(xiàng)目和可接受標(biāo)準(zhǔn)如下表：

       三、生物安全柜性能確認(rèn)主要項(xiàng)目測(cè)試流程及注意事項(xiàng)

       1.下降氣流流速

       使用熱風(fēng)速儀及風(fēng)速儀探針夾具進(jìn)行測(cè)試。安全柜應(yīng)在空態(tài)下進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試平面垂直于送風(fēng)氣流，距離高效空氣過(guò)濾器出風(fēng)面150~300mm的水平面上確定測(cè)量點(diǎn)位置，將測(cè)試面劃分為邊長(zhǎng)不大于600×600mm的格柵，測(cè)點(diǎn)取在每個(gè)柵格的中心。用夾具將風(fēng)速儀探針準(zhǔn)確定位在各測(cè)量點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量，每一風(fēng)速測(cè)點(diǎn)持續(xù)測(cè)試的有效時(shí)間不少于10秒，并記錄最大值、最小值和平均值。當(dāng)生產(chǎn)裝置和工作臺(tái)安裝就位時(shí)，風(fēng)速均勻性的測(cè)點(diǎn)應(yīng)避開(kāi)障礙物。測(cè)試結(jié)果應(yīng)符合要求，即安全柜下降氣流平均流速應(yīng)在0.36~0.54 m/s之間，最小值不得小于0.36 m/s，最大值不得大于0.54 m/s。

       2.空氣潔凈度性能

       首先需對(duì)生物安全柜內(nèi)的空氣潔凈度進(jìn)行靜態(tài)和動(dòng)態(tài)性能驗(yàn)證，通過(guò)檢測(cè)懸浮粒子濃度確定潔凈等級(jí)，潔凈度級(jí)別要求為A級(jí)，懸浮粒子濃度需符合規(guī)定。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)時(shí)，應(yīng)全程監(jiān)測(cè)懸浮粒子濃度，若生產(chǎn)過(guò)程中的污染可能損壞塵埃粒子計(jì)數(shù)器，應(yīng)在設(shè)備調(diào)試和模擬操作期間測(cè)試。生產(chǎn)操作結(jié)束后，經(jīng)15～20分鐘自凈，懸浮粒子應(yīng)達(dá)到靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)。采樣口應(yīng)預(yù)留并標(biāo)識(shí)，宜放置在產(chǎn)品背部，數(shù)量不少于1個(gè)，采樣頭需使用等動(dòng)力采樣頭，采樣管材質(zhì)、長(zhǎng)度、彎管半徑等均有要求，連接處需密封。同時(shí)，應(yīng)制定懸浮粒子預(yù)警值和干預(yù)值，當(dāng)超過(guò)預(yù)警值時(shí)加強(qiáng)關(guān)注或采取糾正措施，超出干預(yù)值時(shí)應(yīng)立即干預(yù)。設(shè)立新采樣位置時(shí)需重新定位采樣頭并制定新值，定期分析監(jiān)測(cè)系統(tǒng)性能、數(shù)據(jù)等，根據(jù)情況修改預(yù)警值和干預(yù)值。采樣時(shí)，位置及探頭朝向需保持一致，時(shí)長(zhǎng)需考慮風(fēng)險(xiǎn)水平，同時(shí)監(jiān)測(cè)兩個(gè)粒徑時(shí)，可采用連續(xù)高讀數(shù)或高頻高讀數(shù)觸發(fā)閾值的方法。

       3.微生物性能

       安全柜需在靜態(tài)和動(dòng)態(tài)下驗(yàn)證微生物性能，通過(guò)浮游菌、沉降菌、表面微生物濃度確定潔凈度級(jí)別，要求達(dá)到A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)時(shí)，采用沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法等，避免對(duì)潔凈區(qū)和操作造成不良影響，監(jiān)測(cè)應(yīng)在關(guān)鍵操作完成后進(jìn)行。浮游菌采樣口應(yīng)預(yù)留并標(biāo)識(shí)，采樣口數(shù)量不少于1個(gè)，采樣管需密封、光滑、不滲漏，連接處易于清潔。測(cè)試方法包括沉降菌法、浮游菌采樣法和表面微生物采樣法，采樣點(diǎn)應(yīng)均勻分布，避開(kāi)回風(fēng)口，采樣次數(shù)一般為一次，靜態(tài)測(cè)試時(shí)若菌落數(shù)超標(biāo)需重新采樣兩次，兩次合格才判為合格。

       4.噪聲

       使用測(cè)量范圍50~100dB、精確度為±1dB、分辨率為1dB且具有“A”計(jì)權(quán)模式的聲級(jí)計(jì)。將聲級(jí)計(jì)設(shè)置為“A”計(jì)權(quán)模式，打開(kāi)安全柜的風(fēng)機(jī)和照明燈，在安全柜前面中心水平向外1000mm、工作臺(tái)面上方380mm處測(cè)量總噪聲；關(guān)閉安全柜的風(fēng)機(jī)和照明燈（室外排氣風(fēng)機(jī)繼續(xù)運(yùn)行），在相同位置測(cè)量背景噪聲。若背景噪聲大于57dB，需根據(jù)儀器操作手冊(cè)等進(jìn)行修正。修正后的結(jié)果應(yīng)符合要求，即安全柜的噪聲不超過(guò)67dB(A)

       5.過(guò)濾器結(jié)構(gòu)完整性

       使用氣溶膠光度計(jì)和氣溶膠發(fā)生器進(jìn)行測(cè)試。首先，通過(guò)氣溶膠發(fā)生器在過(guò)濾器上游產(chǎn)生氣溶膠，使其均勻分布。然后，使用氣溶膠光度計(jì)分別在過(guò)濾器上游和下游進(jìn)行采樣，測(cè)量氣溶膠濃度。計(jì)算下游濃度與上游濃度的比值，即透過(guò)率。過(guò)濾器在任何點(diǎn)的透過(guò)率不得超過(guò)0.01%。測(cè)試時(shí)需確保氣溶膠分布均勻，避免漏點(diǎn)和干擾，同時(shí)注意儀器的校準(zhǔn)和操作規(guī)范，以保證測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

       參考文獻(xiàn)：

       [1]www.ttbz.org.cn等